《最后一间房》是一部融合了爱情、悬疑和惊悚元素的电影。故事讲述了大学生若一（宋伊人饰演）为了完成自己的结业作品而无意陷入一起庞大的凶杀案中。她在一家旅店的“最后一间房”中经历了层层叠叠的不解之谜和错综庞大的离奇事件，最终创造出“本相”，却也深陷险境。
电影中，女尸、女鬼和尘封的怨灵的存在给整个故事增添了神秘和恐怖的氛围。当若一掉臂禁忌，踏入酒店最后一间房时，怨魂惊起，杀意袭来。镜中鬼影飘忽不定，深藏密室的女尸散发着摄魂的凉意。美艳老板娘流露出捉摸不透的诡异深情，而神志不清的男人言语含混，血染的破损日记、残破暗黄的老旧照片和凄厉的惨叫等元素让观众感受到极限可怕。
整个故事通过徐徐打开的最后一间房，给人带来了不寒而栗的感觉。观众将跟随若一一同探索真相，经历恐怖的旅程。
女作家第一次去想换房间的时候见到的是白衣服，被拒绝后看着她上电梯去四楼，第二次再次来到这个宾馆，来到了前台，问谁是老板的时候倪虹洁说自己是老板，那么白衣服就是在这两次女作者来的中间，死的（后面出现尸体的时候并没有任何腐烂的迹象，中间男主跟女作家还折腾了好几天，所以死的时间肯定不长）。
女作家那么坚信白衣服是潇潇可能不仅仅因为他们在走廊说过话，有一个回忆的镜头白衣服跟男主在酒吧，而老外旁边有一闪而过女作家的镜头。
为什么男主的朋友会认不出来潇潇跟老板娘，甚至找了一个跟白衣服那么像的人去假扮潇潇，可能因为大家真的以为哪个人就是潇潇，在最后回忆的镜头，所有潇潇的脸都变成了老板娘，钢琴演奏上，来的路上，游艇上，第一次进宾馆唯独没有酒吧那一段，说明当时带去酒吧的就是白衣服，潇潇刚出现的时候会给街边吹萨克斯的歌者放钱，而在酒吧旁边的人打的激烈的时候她在跳舞，两者的性格是不同的。
那间密室里应该没有人了，浴缸里也没有了钥匙，但是为什么食人鱼会有那么多的镜头，教授会特意去查这种鱼，女作家逃到卫生间的时候里面也有鱼，但是却又没有少的尸体。
最后打斗中，女作家被潇潇锁在密室里，钥匙重新回到了鱼缸，男主报警，但是电影开始的第一幕也是男主报警，手上跟电话上都有血，最后女作家既然能出来就说明潇潇死了，大慨率是男主杀害的，而最后的长镜头鱼缸重新放满水，以及女作家抽烟，可能表达的都是重新开始了，女作家成为了新的老板娘
